RealPAGE凝胶蛋白电泳试剂盒
RealPAGE Gel Protein Electrophoresis Kit
● 产品货号及规格：
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货号
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名称
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组份货号
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组份名称
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规格
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RTD6126-10
(10板胶)
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RTD6126-0508-01
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8% RealPAGE凝胶预混液
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RTD6126-05-01
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5%浓缩胶预混液
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15 ml*
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RTD6126-08-01
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8%分离胶预混液
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50 ml*
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RTD6126-0510-01
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10% RealPAGE凝胶预混液
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RTD6126-05-01
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5%浓缩胶预混液
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15 ml
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RTD6126-10-01
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10%分离胶预混液
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50 ml
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RTD6126-0512-01
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12% RealPAGE凝胶预混液
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RTD6126-05-01
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5%浓缩胶预混液
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15 ml
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RTD6126-12-01
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12%分离胶预混液
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50 ml
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RTD6126-0515-01
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15% RealPAGE凝胶预混液
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RTD6126-05-01
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5%浓缩胶预混液
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15 ml
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RTD6126-15-01
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15%分离胶预混液
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50 ml
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TM1230-03
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10×Tris-MOPS-SDS缓冲液
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500 ml (干粉)
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10% APS/TEMED
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5ml/0.5ml
xg
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RTD6126-50
(50板胶)
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RTD6126-0508-02
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8% RealPAGE凝胶预混液
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RTD6126-05-02
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5%浓缩胶预混液
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80 ml*
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RTD6126-08-02
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8%分离胶预混液
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250 ml*
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RTD6126-0510-02
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10% RealPAGE凝胶预混液
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RTD6126-05-02
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5%浓缩胶预混液
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80 ml
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RTD6126-10-02
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10%分离胶预混液
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250 ml
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RTD6126-0512-02
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12% RealPAGE凝胶预混液
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RTD6126-05-02
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5%浓缩胶预混液
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80 ml
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RTD6126-12-02
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12%分离胶预混液
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250 ml
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RTD6126-0515-02
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15% RealPAGE凝胶预混液
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RTD6126-05-02
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5%浓缩胶预混液
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80 ml
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RTD6126-15-02
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15%分离胶预混液
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250 ml
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TM1230-02
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10×Tris-MOPS-SDS缓冲液
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2×1升(干粉)
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10% APS/TEMED
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5ml/0.5ml
xg
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* 制备一块1 mm8cm×8cm凝胶需要分离胶预混液约4.5 ml，浓缩胶预混液约1.5 ml。
RTD6126-10每套溶液可以配制至少10板凝胶; RTD6126-50每套溶液可以配制至少50板凝胶;
● 产品简介：
该产品利用聚丙烯酰胺凝胶电泳原理，采用合理设计的预混合配方和配制流程，可在20-30分钟内配制得到高质量的聚丙烯酰胺凝胶，用于变性和非变性蛋白凝胶电泳。本产品提供四种常用分离胶浓度8%、10%、12%和15%，可以满足绝大多数蛋白电泳需求。
● 特点：
1. 方便：分离胶和浓缩胶的制备只需用预混液加上APS和TEMED即可；
2. 快速：20-30分钟内即可制备好凝胶。
3. 安全：预混液，不用接触有毒粉末。
4. 稳定：独特pH中性预混液配方，凝胶4℃稳定贮存一年。
● 贮存： 4℃贮存。有效期一年。
● 使用说明：
一 凝胶制备：
以下程序以制备一块1 mm厚，大小8cm×8cm凝胶为例，实际操作按照使用胶板规格调整试剂用量。
1．参照凝胶模具说明书，装配好凝胶模具。
2. 根据下表参考选择合适的凝胶浓度
不同浓度的SDS-PAGE分离胶的最佳分离范围
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SDS-PAGE分离胶浓度
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最佳分离范围
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8%
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30-90kD
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10%
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20-80kD
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12%
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12-60kD
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15%
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10-40kD
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3．分离胶配制：
参照下表，在凝胶模具中灌入分离胶溶液（凝胶液加至距前玻璃板顶端约1.5 cm或距梳齿约0.5 cm即可），然后在分离胶溶液上轻轻覆盖一层1-2 cm的水层，使凝胶表面保持平整；静置10-15分钟（25℃），待分离胶和水层之间出现一个清晰的界面后，说明凝胶已聚合；去除覆盖在分离胶上的水层。
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分离胶配制
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浓缩胶配制
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分离胶预混液
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4.5 ml
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/
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5%浓缩胶预混液
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/
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1.5 ml
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TEMED
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4.5 μl
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1.5 μl
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10% APS
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45 μl
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15 μl
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4．浓缩胶配制：
将浓缩胶溶液加至分离胶的上面，直至凝胶溶液到达前玻璃板的顶端；将梳子插入凝胶内，避免产生气泡；静置15-20分钟（25℃），等待浓缩胶聚合。
注：凝胶的聚合时间与环境温度有关。夏天温度较高时，聚合较快；冬天气温低时，聚合时间会延长。可以根据环境温度的不同调节APS的加入量。
二 电泳：
1. Tris-MOPS-SDS电泳缓冲液配制：
10×Tris-MOPS-SDS缓冲液 溶液型 配制方法：
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货号
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10×Tris-MOPS-SDS缓冲液
干粉型
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10×Tris-MOPS-SDS缓冲液
溶液型 配制量
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TM1230-03
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500ml 干粉
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加超纯水，彻底溶解后定容至 500 ml
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TM1230-02
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1升 干粉
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加超纯水，彻底溶解后定容至 1000 ml
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注： = 1 \* GB3 ① 10×Tris-MOPS-SDS缓冲液溶液 4℃避光贮存，如溶液变黄，表明试剂失效，不能使用。
= 2 \* GB3 ② 本产品提供10×Tris-MOPS-SDS电泳缓冲液，适用于变性蛋白电泳。如要进行非变性电泳，请自行配制不含SDS的Tris-MOPS电泳缓冲液（见缓冲液配方）
电泳前，按照下表配制1×Tris-MOPS-SDS缓冲液
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1×Tris-MOPS-SDS缓冲液配制量
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400 ml
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1000 ml
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10×Tris-MOPS-SDS缓冲液
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40 ml
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100 ml
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超纯水
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360 ml
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900 ml
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注：400 ml 1×Tris-MOPS-SDS缓冲液可以完成一次电泳。
2. 凝胶凝固好后，上样，电泳。
电泳条件
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电泳缓冲液
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稳压电泳
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起始电流
(一板胶)
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结束电流
(一板胶)
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电泳时间
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1×Tris-MOPS-SDS缓冲液
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140 V
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90-120 mA
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30-45 mA
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45-70分钟
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注： = 1 \* GB3 ① 本产品使用Tris-MOPS-SDS缓冲液或Tris-MES-SDS缓冲液，不适合用Tris-甘氨酸-SDS缓冲液电泳。
= 2 \* GB3 ② 1×Tris-MOPS-SDS缓冲液可以回收利用2-3次。
三 缓冲液配方：
1 10x Tris-MOPS-SDS缓冲液 (1 L) (Cat No: TM1230-02)
组分浓度：0.5 MTris,0.5 MMOPS, 1% SDS，10mMEDTA 2Na，50mMNaHSO3
Tris base 60.6 g
MOPS 104.6 g
SDS 10 g
EDTA Na 3 g
NaHSO3 5.2 g
用灭菌ddH2O定容至1 升
Do not adjust the pH (~pH 7.7)
2 10x Tris-MOPS缓冲液 (1 L) (Cat No: TM1240-02)
组分浓度：0.5 MTris,0.5 MMOPS，10mMEDTA 2Na
Tris base 60.6 g
MOPS 104.6 g
EDTA Na 3 g
用灭菌ddH2O定容至1 升
Do not adjust the pH (~pH 7.7)
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