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快速铜染蛋白染色试剂盒

快速铜染蛋白染色试剂盒

产品编号:RTD6207

产品规格:10次

数量
价格 ¥300

快速蛋白铜染试剂盒

产品编号

规格

运输

RTD6207

10 T

RT

产品简介:                                                    

本试剂采用以铜离子为基础的负染色方法,用于SDS-PAGE或Native-PAGE电泳凝胶染色,不需要使用含有刺激性的甲醛和冰醋酸,实验方便快速,可以在30 min左右完成,最低能够检测出2 ng的蛋白条带,该方法不对蛋白质产生修饰作用,而且经过脱色液处理后,可以用于电洗脱或采用PAGE胶蛋白微量回收试剂盒(货号:RTD8108)进行胶回收,以便进行质谱和测序分析等,也可以用于电转移或用其他染色方法(银染或考染)对胶重新染色。

按照每次使用50 ml1×即用型染色液计算,本产品可以染色 8-10块mini-PAGE(8×10cm)胶。

产品组成:

产品编号

产品名称

规格

贮存

运输

RTD6207-01

增强液(4×)

100 ml

4-8

RT

RTD6207-02

染色液(10×)

60 ml

4-8

RT

RTD6207-03

脱色液(10×)

100 ml

4-8

RT

-

说明书

1

-

-

储存条件

按照标签温度贮存,常温运输。开封后一年有效。

凝胶染色的操作步骤:

以下步骤以一块1 mm厚度8×10cm的凝胶操作为例。

. 漂洗:

取出电泳后的 PAGE 凝胶,用超纯水漂洗两次,每次1分钟。

. 前处理:

2.1 准备工作:将增强液(4×)用超纯水稀释4倍,配成1×增强液。

2.2 凝胶中加入50 ml 1×增强液,常温摇床慢摇10分钟。

. 漂洗:

弃增强液,用超纯水漂洗凝胶两次,每次10-20秒,至泡沫完全清除干净。

注:漂洗时间不要太长,否则会导致染色效果下降。

. 染色:

4.1 准备工作:将染色液(10×)用超纯水稀释10倍,配成1×即用型染色液。

    注:染色液略成半浑浊状态。

4.2凝胶中加入 50 ml 1×即用型染色液,摇床慢摇5-10分钟,观察结果:在黑色背景下,可见光观察,蛋白条带为棕褐色,无蛋白区域为蓝绿色;可见光灯箱观察(凝胶底部打光),蛋白质条带反显白色,无蛋白的胶区则为黄绿色。

. 漂洗:

弃染色液,超纯水洗涤凝胶2次,每次摇床慢摇1分钟。

注:凝胶可以在水中保存1-2周。

. 脱色:

6.1 准备工作:将脱色液(10×)用超纯水稀释10倍,配成1×即用型脱色液。

6.2 如需要进行蛋白切胶回收,将所需的蛋白质条带切下,用超纯水漂洗切下的凝胶一次;如凝胶需要考染,银染或转膜实验,直接用超纯水漂洗整个凝胶一次。

6.3 弃水,凝胶中加入适量1×即用型脱色液覆盖凝胶,摇床慢摇5分钟,倒掉脱色液;

6.4 重复脱色步骤2次。脱色完全的标志是白色凝胶完全脱色为无色透明。

6.5 超纯水漂洗凝胶两次,进行后续实验操作。

实验示例:

4-20% RealPAGE Precast Gel

 

lane 1-5: BSA分别为1,2,3,4,5μg

 

M:RTD6149 10-250kD

 

lane 6: Bacterial Lysis

 

凝胶显影后(脱色前)蛋白条带在黑色背景下为蓝绿色(左)

 

可见光灯箱观察(凝胶底部打光),蛋白质条带反显白色(右)



 
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