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溶菌酶溶液（10mg/ml）

● 产品规格:

   10 ml

● 产品内容:

● 保存条件：

    未配制的溶菌酶干粉和溶解液-20℃保存，有效期24个月；配制好的溶液-20℃贮存有效期12个月。

● 产品说明:

     Lysozyme，中文名为溶菌酶，EC Number:3.2.1.17，CAS: 12650-88-3，活性>20KU/mg，纯化自蛋清(egg white)，不含DNase、RNase和Protease，可以用于以质粒抽提、蛋白纯化等为目的的细菌裂解。

● 溶液配制方法：

取10 ml溶解液加到溶菌酶干粉中，彻底溶解，即配成10 ml（10mg/ml）的溶菌酶溶液，-20℃保存。

● 使用方法：

细菌裂解：

1. 细菌过夜培养菌液10 ml 12,000 rpm离心 5 min 后，弃上清，尽量弃除残余培养基，留取管底部菌体。

2. 加入1 ml细菌裂解液，50μl 10mg/ml 溶菌酶溶液，用吸头吹打至无可见细胞团块，重悬菌体。

   注：此步骤可加入蛋白酶抑制剂如PMSF，保护蛋白，抑制降解；如裂解液比较粘稠，可以加入DNaseI溶液，消化基因组DNA。

3. 37℃孵育20 min，期间轻弹离心管数次以加速裂解。

注：溶菌酶的用量和处理时间与处理的细菌种类密切相关，用户可以根据细菌种类进行调节。如革兰氏阳性菌应将处理时间延长到30-60分钟。

4. 裂解完成后 13,000rpm4℃离心5 min，将上清（上清中即为可溶性蛋白）转移至新的离心管中，直接进行下一步纯化或检测实验。